石蠟包埋步驟 完成切片的制作流程 石蠟切片制作 切片制備

一、組織固定

 按1：20將組織放入固定液。

二、組織脫水、滲透與包埋

1、組織脫水：

70% 乙醇（30min）→85%乙醇(30min) →95%乙醇(30min)→100%乙醇(30min)→100%乙醇(30min)。

需要注意的問題：

（1）若組織數量過多時，應分開脫水；

（2）脫水的體積至少為組織體積的4倍；

（3）乙醇純度越高時，脫水的時間減少，否則引起組織過硬；

（4）最好能攪拌，使脫水充分；

2、透明：

二甲苯I (30min)→二甲苯II(30min)。

需要注意的問題：

 在二甲苯的時間不宜過短或過長。時間過短引起透明不充分，影響后面滲透包埋；時間過長則引起組織變脆。

3、滲透：

石蠟1 (60min)→石蠟2(60min)→石蠟3(60min)

三、包埋

將組織放入在包埋模中，放上包埋盒，用包埋機熱臺進行包埋。將包埋好的組織放在石蠟包埋機的冷臺上冷卻。

需要注意的問題：

包埋時，注意一定要等冷卻好后才取下包埋盒，不然石蠟容易粘在包埋模上。

四、石蠟切片

將包埋好的組織于石蠟切片機上進行切片，切片厚度約4μm。

五、攤片、烤片

將切好的組織蠟片，放于漂片機中展開，再將切片撈于載玻片上，進行烤片。